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操縱步驟

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫，試劑不能直接在37 溶解；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應猜測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1、 加樣：分別設空缺孔、標準孔、待測樣品孔。空缺孔加樣品稀釋液 100 ，余孔分別加標準品或待測樣品100 ，留意不要有氣泡，加樣 時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37 溫育2小時。為保證實驗結果有效

性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2、 棄往液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 （臨用前配制），酶標板加上覆膜，37 溫育1小時。

3、 棄往孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400 /每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4、 每孔加檢測溶液B工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育1小時。

5、 棄往孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6、 每孔加底物溶液90 ，酶標板加上覆膜37 避光顯色（反應時間控制在15-30分鐘，當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔梯度不明顯時，即可終止）。

7、 每孔加終止溶液50 ，終止反應，此時藍色立轉。終止液的加進順序應盡量與底物    液的加進順序相同。

8、 立即用酶標儀在450nm波長丈量各孔的光密度（ 值）。

說明

1、  由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，

    本產品可能存在一定的質量技術風險。

2、  *的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操縱以及當時的實驗環境密切相關，請務必

預備充足的標本備份。

3、 在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和微生物的   污染，由于蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。

4、 試劑盒保存：請收到試劑盒后盡快將標準品、檢測溶液A和檢測溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免濕潤。

5、 濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

6、 剛開啟的酶聯板孔中可能會有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。

7、 有效期：6個月。

8、 本操縱說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。